摘要:通过分析多种已知的毒蛇 蛇毒类凝血酶( SVTLEs) 基因序列同源性 , 以保守的 N 和 C 末端氨基酸序列设计引物 , 克隆得到白唇竹叶青 ( Trimeresurus albolabris )SVTLE 基因并分析其序列。以毒腺总 RNA 为模板进行 RT-PCR , 纯化并克隆至 pMD18-T 。结果表明,该酶基因大小为 777 bp ;推测出其相应氨基酸序列含 258 个氨基酸残基 , 分子量为 28.02 KD, pI 值为 6.07 ;其 3 个可能糖基化位点为 NDT103~105 , NNS121~123 , NRT251~253 ;与其它毒蛇的已知 SVTLEs 基因比较分析,推测出其含 6 对二硫键即 Cys31-162 、 Cys50-66 、 Cys98-256 、 Cys142-210 、 Cys174-189 和 Cys200-225 ;其催化活性中心氨基酸残基为 His65 、 Asp110 和 Ser204 。分子进化树分析表明 , 毒蛇 SVTLEs 一级结构的进化具有一定种属特征,可为蛇的系统分类提供参考。