摘要:为从南方鲇(Sihunls meridionalis)中扩增葡萄糖激酶(GK)基因,根据已报道的GK基因结构中的氨基酸保守区域,设计简并引物;从南方鲇肝胰脏中迅速抽提RNA,将扩增出的产物克隆到(pMD18-T载体上并导入到大肠杆菌DH5a中;阳性克隆鉴定后测序。将测序得到的南方鲇GK基因与已知的GK基因进行核苷酸序列比较,结果表明其与鲤(Cyprinus carpio)的同源性较高,达到83%;将此基因片段与其他已知的JK基因做出进化关系的确定,用SPhylip(软件 NJ bootstrap方法构建GK系统树,它与草鱼(Ctenopahryngodon idellus)、鲤、鲫(Carassius auratus)、翘嘴红鲌(Eruthroculter ilishaeformis)、虹鳟(Oncorhynchus mykiss)、大西洋鲑(Salmo salar)、金头鲷(Sparus aurata)、黄易鲷(Rhabdosargus sarba,)等以较高的支持度形成一个分支。本研究成功地从南方鲇肝胰脏中扩增到长度为688 bp(的编码蛋白酶的基因片段,为今后克隆南方鲇GK基因全长序列及该基因在不同营养条件下的表达等研究奠定基础。