基于Chelex-100和蛋白酶K的蚊虫足样本DNA提取技术
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重庆师范大学 昆虫与分子生物学研究所 媒介昆虫重庆市重点实验室 重庆市动物生物学重点实验室,重庆 401331

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A DNA Extraction Technique for Mosquito Legs Based on Chelex-100 and Proteinase K
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    【目的】探索出一种蚊虫附肢(如单只足)微量DNA的提取方法,用于蚊虫分子鉴定和基因型研究。【方法】采用Chelex-100溶液和蛋白酶 K 结合的方法用于单只蚊虫足的微量 DNA 的提取。基于该方法,将不同方法保存的不同蚊种的足作为实验材料,从中提取蚊虫基因组 DNA ;以之为模板,扩增核糖体 DNA 的 D2 , D3 , ITS2 区以及线粒体 COI 和COII 基因,并对 PCR 扩增产物进行测序。【结果】提取到了高质量的基因组DNA,PCR扩增获得了高质量的 DNA 扩增片段,进一步测序获得了高质量的序列。【结论】该方法价格便宜,操作简单方便,减少了对蚊虫样本的依赖。单只足用于DNA 提取不影响对剩下的部分开展形态学等研究,可以作为蚊虫分子生物学研究中微量 DNA 样本提取的重要方法,也为其他昆虫微量 DNA 的提取提供理论依据。

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引用本文

闫振天,司风玲,鲜鹏杰,何正波,陈斌
.基于Chelex-100和蛋白酶K的蚊虫足样本DNA提取技术
[J].重庆师范大学学报自然科学版,2017,(5):26-

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