【目的】为维护三峡库区大宁河流域生态安全，对该流域景观格局变化和生态安全格局进行研究。【方法】基于大宁河流域2000，2010和2020年共3期的土地覆被数据，综合分析研究区景观格局和土地覆被类型的时空演变；遴选生态阻力评价指标，利用ArcGIS建立综合生态阻力面，基于最小累积阻力(Minimum cumulative resistance，MCR)模型、重力模型构建大宁河流域生态安全格局，并提取生态廊道和生态节点。【结果】1) 流域景观格局呈现破碎度、连通度、蔓延度和均匀度均随时间变化不断降低的总趋势；2) 流域内覆被类型以林地和耕地为主，耕地、草地的面积随时间变化而减少，林地、湿地、水域和建设用地的面积随时间变化增加；3) 流域整体生态安全水平较高，以高、较高生态安全为主，两者所对应区域面积占比为64.3%，低和较低生态安全等级的区域面积占比为19.1%；4) 共提取研究区一、二级潜在生态廊道20和23条，得到一、二级生态节点17和49个，结合研究区实际提出研究区“一线两核两区”的生态安全格局优化框架及相应措施。【结论】研究区生态安全总体较好，但存在空间异质性较强特点，今后需要在总体优化框架下协调生态环境保护和社会经济发展，进一步提升整个区域生态环境质量。