【目的】筛选出一种最优的固定化尖吻蝮(Deinagkistrodon acutus〖WTBZ〗)蛇毒金属蛋白酶(Snake venom metalloproteinase，SVMP)的方法。【方法】采用D380大孔树脂、海藻酸钠-壳聚糖、溶胶-凝胶等3种载体固定化SVMP，用分光光度法检测固定化金属蛋白酶和游离金属蛋白酶的酶活性，计算它们的酶搭载率、酶活回收率，并检验它们的温度耐受性、pH耐受性和重复使用性，并由此筛选出最优固定化方法。【结果】溶胶-凝胶固定化酶、海藻酸钠-壳聚糖固定化酶和D380大孔树脂固定化酶的酶搭载率分别为91.47%，78.14%和49.44%；D380大孔树脂固定化酶、海藻酸钠-壳聚糖固定化酶和溶胶-凝胶固定化酶的酶活回收率分别为39.00%，39.53%和41.17%；重复使用4次后，溶胶-凝胶固定化酶的酶活回收率最高；溶胶-凝胶固定化酶pH耐受性最优，对温度的耐受性也最高。【结论】溶胶-凝胶固载体固定尖吻蝮蛇SVMP的效果最优。