依次采用不锈钢珠破碎结合IPG裂解液法、液氮研磨结合IPG 裂解液法、液氮研磨结合 PBS 裂解液法和不锈钢珠结合 PBS 裂解液法提取意大利蜜蜂（Apis mellifera ligustica，Ap）中肠总蛋白，并通过 SDS-PAGE 对获得的总蛋白进行质量检测。结果显示，与其他 3 种方法相比，利用不锈钢玻璃珠破碎处理结合 PBS 裂解液法能够提取并获得丰度较高的 Ap 中肠总蛋白，蛋白质种类较多，分子量大小为 18.4～116 kD，样品的电泳条带清晰可见。应用该方法还开展了 Ap 感染东方蜜蜂微孢子虫（Nosema ceranae，Nc）后中肠组织蛋白质的差异表达分析，结果显示感染 Nc的 Ap 中肠出现了蛋白质的上调表达；同时 SDS-PAGE 结果显示该方法也适用于中华蜜蜂（Apis cerana ceranaFabricius，Api）中肠总蛋白的提取。利用不锈钢玻璃珠破碎处理结合 PBS 裂解液法提取 Ap 中肠总蛋白方法的建立将有助于对蜜蜂中肠蛋白进行鉴定分析，为深入研究蜜蜂中肠蛋白质组成、功能及其肠道免疫机制奠定基础。